Culture cellulaire en 3D à partir de cellules souches humaines : sphéroïdes et organoïdes des systèmes neuronaux, musculaires et cardiaques Mixte : présentiel / à distance
Dernière mise à jour : 26/06/2025
Description
Cours interactifs
- Bases théoriques sur les cellules souches humaines à pluripotence induite (iPS)
- Les différentes techniques et modèles de cultures 3D : conceptions, avantages, inconvénients et problématiques rencontrées
- La culture 3D avec l'utilisation de biomatériaux tels que les hydrogels : exemple du muscle cardiaque
- Techniques d'imagerie et observation de cultures cellulaires 3D
- Table ronde : aide personnalisée à la conception de cultures complexes ainsi que leurs analyses possibles
Manipulations au laboratoire
Chaque stagiaire manipulera des iPS en laboratoire confiné (L2) et débutera une culture 3D. Ces cultures seront complexifiées afin d'améliorer leur maturité et leur pertinence. Pour finir, les stagiaires réaliseront des étapes clés de protocoles menant à l'analyse des cultures 3D par microscopie.
- Vous partirez d'iPS afin de former des sphéroïdes de 3 manières différentes pour obtenir des progéniteurs de neurones
- Vous apprendrez à inclure les sphéroïdes en diverses matrices et à les cultiver dans plusieurs dispositifs permettant de guider la pousse axonale (chambre en silicone et puce microfluidique). Par la suite, vous les analyserez par microscopie à fluorescence
- Vous générerez des cultures 3D de cardiomyocytes associées à des hydrogels
- Vous préparerez des sphéroïdes pour des analyses par microscopie en réalisant des étapes clés pour la transparisation et la coupe au vibratome. Cette session sera suivie d'une analyse par microscopie confocale et par microscopie à feuillet de lumière
- Bases théoriques sur les cellules souches humaines à pluripotence induite (iPS)
- Les différentes techniques et modèles de cultures 3D : conceptions, avantages, inconvénients et problématiques rencontrées
- La culture 3D avec l'utilisation de biomatériaux tels que les hydrogels : exemple du muscle cardiaque
- Techniques d'imagerie et observation de cultures cellulaires 3D
- Table ronde : aide personnalisée à la conception de cultures complexes ainsi que leurs analyses possibles
Manipulations au laboratoire
Chaque stagiaire manipulera des iPS en laboratoire confiné (L2) et débutera une culture 3D. Ces cultures seront complexifiées afin d'améliorer leur maturité et leur pertinence. Pour finir, les stagiaires réaliseront des étapes clés de protocoles menant à l'analyse des cultures 3D par microscopie.
- Vous partirez d'iPS afin de former des sphéroïdes de 3 manières différentes pour obtenir des progéniteurs de neurones
- Vous apprendrez à inclure les sphéroïdes en diverses matrices et à les cultiver dans plusieurs dispositifs permettant de guider la pousse axonale (chambre en silicone et puce microfluidique). Par la suite, vous les analyserez par microscopie à fluorescence
- Vous générerez des cultures 3D de cardiomyocytes associées à des hydrogels
- Vous préparerez des sphéroïdes pour des analyses par microscopie en réalisant des étapes clés pour la transparisation et la coupe au vibratome. Cette session sera suivie d'une analyse par microscopie confocale et par microscopie à feuillet de lumière
Objectifs de la formation
- Connaître les différentes techniques pour passer d'une culture de cellules souches 2D à 3D : formation de sphéroïdes et d'organoïdes de modèles neuronaux et cardiomyocytes
- Prendre en main différents systèmes de cultures 3D à partir de cellules souches adultes ou d'iPS : utilisation de puces en silicone, de puces microfluidiques et de matrices type hydrogel
- Appréhender et pratiquer différentes techniques d'analyses des cultures 3D
- Prendre en main différents systèmes de cultures 3D à partir de cellules souches adultes ou d'iPS : utilisation de puces en silicone, de puces microfluidiques et de matrices type hydrogel
- Appréhender et pratiquer différentes techniques d'analyses des cultures 3D
Public visé
Techniciens, ingénieurs ou chercheurs souhaitant maîtriser les cultures complexes à partir de cellules souches humaines dont les iPS.
Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.
Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.
Prérequis
Prérequis : avoir une expérience en culture cellulaire ou avoir suivi la formation "hiPSC : culture, édition du génome, contrôles qualités et différenciations"
Modalités pédagogiques
Alternance de cours interactifs (8h) et de travaux pratiques (18h) dans les locaux du laboratoire PGNM à l'Institut NeuroMyoGène.
Moyens et supports pédagogiques
A l'issue de la formation, un livret récapitulatif de toute la formation sera remis aux stagiaires.
Modalités d'évaluation et de suivi
Tout au long de la formation, des exercices corrigés permettront au stagiaire d'évaluer son acquisition des connaissances.
Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation
Formateurs
RL
RAHARINOSY Lova-Tiana
Instrumentation Physique
Profil du / des Formateur(s)
Romain, LE BARS,S. LECART, V. NICOLAS, Mickaël BOURGE, C. CHAMOT, F. CORDELIERES, L. HELIOT, P. MAHOU, T. MANOLIU, A. SALLES (ingénieurs de recherche), L. BESSE, M. TEMAGOULT (ingénieurs d'études), M. ERARD (professeur) et V. ROUGER (ingénieur d'application)
Informations sur l'accessibilité
Les participants auront accès lors de la formation à l'intégralité des microscopes présents sur la plateforme Imagerie-Gif (13 setups). Le descriptif complet des systèmes est présent sur notre site internet.
Les participants doivent venir avec un ordinateur portable le jour des TP d'analyse d'images (aucune configuration / installation particulière n'est nécessaire).
Les participants doivent venir avec un ordinateur portable le jour des TP d'analyse d'images (aucune configuration / installation particulière n'est nécessaire).